(一)試劑   

(1)亞甲基藍(lán)溶液將6．8g濃硫酸暖纛地注入約50ml水中，待冷卻話加亞甲基藍(lán)0.03g和無水硫酸鈉50g，溶解后加水稀釋至1L。

(2)0．5g／L陰離子表面活性劑溶液。

(3)氯仿。

(二)操作步驟

在帶塞試管中加入3m1亞甲基藍(lán)溶液和5ml氯仿，加入1滴0．5g／L陰離子表面活性劑溶液，塞上塞子充分振蕩，并使其分層，一直滴至上下兩層對反射光呈同一顏色為止。一般需要l0～12滴陰離子表面活性劑溶液。接著滴加l9幾試樣溶液，振蕩后讓其分層，靜置觀察兩層顏色。

(三)結(jié)果和判斷

如果氯仿層顏色較深，而水層幾乎無色，則表明存在陰離子表面活性劑。因為試劑是酸性的，如果存在肥皂的話，則已經(jīng)分解成脂肪酸，所以肥皂不能被檢出。

如果水層的顏色較深，則表明存在陽離子表面活性劑，因為試劑是酸性的，兩性表面活性劑通常呈(微弱的)陽性結(jié)果。

如果水層呈乳狀，或兩層基本呈同一顏色則表明有非離子表面活性劑存在。如果有疑問，可用2ml水代替試樣溶液進(jìn)行對照試驗。硝酸鹽、磷酸鹽等無機(jī)鹽不會產(chǎn)生干擾。本試驗的改良方法是在5m110g／L試樣溶液中加入lOml亞甲基藍(lán)溶液和5ml氯仿，將混合物振蕩2～3min，然后使其分層，觀察兩層顏色，若氯仿層呈藍(lán)色的話，則表明存在陰離子表面活性劑。再加入試樣溶液，則氯仿層產(chǎn)生更深的藍(lán)色。