聚乙二醇含量的測(cè)定，目前已公布了二個(gè)標(biāo)準(zhǔn)方法，即化學(xué)法(仲裁法)(GB5560—1985)和高壓液相色譜法(GB／T17830—1999)，其他用薄層色譜定量。薄層色譜/火焰離子檢測(cè)技術(shù)、核磁共振光譜、反相液相色譜等方法也可參考。
【方法一】化學(xué)法(仲裁法)
(一)方法概述
本法參照標(biāo)準(zhǔn)GB 5560—1985。由于活性物和聚乙二醇都能溶于氯化鈉溶液中，但活性物還可以溶于乙酸乙酯中，而聚乙二醇卻不溶。因此，可采用萃取分離的方法來(lái)分析產(chǎn)品中的活性物和聚乙二醇的含量。
(二)儀器和試劑
(1)分液漏斗 250ml，具磨口玻璃塞及套管(見(jiàn)圖1)。
圖1分液漏斗
(2)分液漏斗50ml，具磨口玻璃塞。
(3)單口燒瓶250ml、500ml，具磨口玻璃塞(配有冷凝器)或使用脂肪萃取器。
(4)燒杯l50ml。
(5)抽濾瓶250ml。
(6)布氏漏斗 與抽濾瓶配套。
(7)濾紙定量濾紙。
(8)恒溫器501型或相同功效的超級(jí)恒溫器。
(9)干燥器。
(10)乙酸乙酯(HG 3—1226)，化學(xué)純。
(11)三氯甲烷(氯仿)(GB 682)，化學(xué)純。
(12)丙酮(GB 686)，化學(xué)純。
(13)石油醚(HG 3-1003)，沸程30～
(14)氯化鈉(GB l266)，化學(xué)純，
(三)操作步驟
1.試樣制備
若樣品系清液，應(yīng)攪拌均勻；若樣品系混濁或含沉淀物，則須加熱至
稱取試樣(5±0.05)g(稱準(zhǔn)至0.0019)。
2.分離活性物和聚乙二醇
開(kāi)啟恒溫器，校正溫度(35±1)℃，使帶夾套分液漏斗保持上述溫度。
將試樣置于150ml燒杯中，加入25ml乙酸乙酯，攪拌，全部溶解后移入
再加50ml乙酸乙酯于含有上述氯化鈉溶液的漏斗B中，充分搖動(dòng)，靜止30min。然后將下層氯化鈉溶液放人第3只250ml分液漏斗C中，并加入25ml乙酸乙酯于漏斗C中充分搖動(dòng)，靜止30min。將下層氯化鈉溶液移入500ml分液漏斗D中。將漏斗C中的乙酸乙酯移入漏斗B。
加25ml氯化鈉溶液于漏斗B中，充分搖動(dòng)，靜止30min。然后將下層氯化鈉溶液移入漏斗C中，洗滌漏斗C，再將此氯化鈉溶液移入漏斗D中。隨后用10ml氯化鈉溶液洗滌漏斗C，再移入漏斗D中。
至此，漏斗D存有氯化鈉溶液，內(nèi)含聚乙二醇；而活性物則在漏斗A和B的乙酸乙酯溶液中。總的分離步驟如圖2所示。
圖2萃取分離步驟圖
3.活性物含量的測(cè)定
將漏斗A中的乙酸乙酯溶液移入250ml單口燒瓶中，用漏斗B中的乙酸乙酯溶液洗滌漏斗A。然后移入上述的250ml單口燒瓶中。另用25ml乙酸乙酯洗滌漏斗B，也移人漏斗A中，洗滌漏斗A，然后再移人已存有乙酸乙酯溶液的250ml單口燒瓶中。再用250ml乙酸乙酯重復(fù)上述洗滌操作。使A和B漏斗中的所有物質(zhì)充分洗凈，全部收集于250ml單口燒瓶中，在水浴上蒸餾，去除溶劑。
全部蒸餾完畢后，用75ml乙酸乙酯溶解燒瓶?jī)?nèi)的殘余物質(zhì)，加熱至
圖3驅(qū)除溶劑裝置
將上述單口燒瓶移入干燥器中冷卻，稱量，放入鼓風(fēng)烘箱中，于(100±2)℃加熱10～30min，移出，用冷的干燥空氣驅(qū)除殘余的溶劑后置于干燥器中，冷卻至室溫，稱重。重復(fù)上述加熱、驅(qū)除溶劑、冷卻、稱重的操作，直至兩次連續(xù)稱重之差不超過(guò)0.1％。活性物含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)Xl按式(1)計(jì)算
(1)
式中 m0——試樣的質(zhì)量，g；
ml——活性物的質(zhì)量，g。
聚乙二醇含量的測(cè)定方法為加lOOml氯仿于含氯化鈉溶液的分液漏斗D中，充分搖動(dòng)后靜止(至少靜止l5min)。待分相清晰后，將下層氯仿溶液移入500ml單口燒瓶中。重復(fù)上述操作兩次，每次用l00ml氯仿。將存有此3份氯仿溶液的單口燒瓶置于水浴中進(jìn)行蒸餾，去除溶劑。
待溶劑全部去除后，用50ml氯仿溶解單口燒瓶?jī)?nèi)的殘余物質(zhì)，將此溶液倒入裝有濾紙的布氏漏斗內(nèi)，進(jìn)行過(guò)濾。洗滌單口燒瓶和濾紙共6次，每次用10ml氯仿，收集濾液于一只已稱至恒重的250ml的單口燒瓶中，在水浴中蒸去溶劑。然后，加l5ml丙酮溶解殘余物。蒸去丙酮，吹入冷的干燥空氣，以盡量驅(qū)除溶劑。再用15ml丙酮重復(fù)上述操作。然后加入loml石油醚溶解燒瓶?jī)?nèi)的殘余物質(zhì)，蒸去溶劑，吹入冷的干燥空氣，盡量驅(qū)除溶劑。
將上述燒瓶移入干燥器中冷卻，稱量，再放人鼓風(fēng)烘箱中，在(100±2)℃下加熱l0～30min。移出，用冷的干燥空氣驅(qū)除殘余溶劑后置于干燥器中，冷至室溫，稱量。重復(fù)上述加熱、驅(qū)除溶劑、冷卻、稱量等操作，直至兩次連續(xù)稱重之差不超過(guò)0.1％。
聚乙二醇含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X2按式(2)計(jì)算
（2）
式中 m0——試樣的質(zhì)量，g；
m2——聚乙二醇的質(zhì)量，g。
【方法二】高效液相色譜法
本法參照標(biāo)準(zhǔn)GB／Tl7830—1999。適用于測(cè)定烷基聚氧乙烯醚和烷基酚聚氧乙烯醚中的聚乙二醇含量。
(一)方法概述
以Cl8硅膠鍵合相柱，純甲醇或甲醇／水混合溶劑作流動(dòng)相，對(duì)醇醚型非離子表面活性劑進(jìn)行反相高效液相色譜法分離。聚乙二醇由于極性較高最先洗脫，從而與表面活性劑主成分發(fā)生分離。用示差折光檢測(cè)器檢測(cè)流出物，并記錄所分離的組分的保留時(shí)間及其峰面積。根據(jù)已知重量的一定聚合度的聚乙二醇在相同的分析條件下所得到的色譜保留時(shí)間及峰面積來(lái)確認(rèn)樣品中的聚乙二醇峰，并通過(guò)計(jì)算儀器的響應(yīng)因子來(lái)求得分析樣品中聚乙二醇含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
(二)儀器和試劑
(1)容量瓶25ml。
(2)濾膜及過(guò)濾器0.45μm孔徑。
(3)微量注射器。
(4)高壓液體輸送泵。
(5)示差折光檢測(cè)器。
(6)色譜柱Cl8硅膠鍵合相。
(7)甲醇(GB 683)。
(8)聚乙二醇摩爾質(zhì)量600～2000。
(三)操作步驟
1.色譜條件溫度室溫。流動(dòng)相 甲醇或甲醇／水(90：10，體積)的混合溶劑，使用前經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾并脫氣。
流速lml／min。
色譜柱Cl8硅膠鍵合相，l0μm。
檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器，靈敏度根據(jù)具體分析而定。
2.試驗(yàn)份
精確稱取樣品0.2～
3.色譜分析
開(kāi)啟儀器，按高效液相色譜法一般的操作規(guī)程設(shè)定好色譜條件，并穩(wěn)定必要的時(shí)間。將準(zhǔn)備好的分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液分別進(jìn)樣，進(jìn)行色譜分析，記錄相應(yīng)的分離結(jié)果。進(jìn)樣量適量，在分析中應(yīng)保持一致，并且使標(biāo)樣與分析樣品保持一致。
(四)計(jì)算
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的聚乙二醇峰的保留時(shí)間確認(rèn)分析樣品中的聚乙二醇峰，并按式(1)計(jì)算聚乙二醇含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
(1)
式中 As——樣品的聚乙二醇峰面積；
AR——標(biāo)樣的聚乙二醇峰面積；
Vs——樣品的定容體積，ml；
VR——標(biāo)樣的定容體積，ml；
ms——樣品的質(zhì)量，g；
mR——標(biāo)樣的質(zhì)量，9；
μs——樣品的進(jìn)樣體積，μl；
μR——標(biāo)樣的進(jìn)樣體積，μl。
聚乙二醇含量平行測(cè)定結(jié)果之差應(yīng)不超過(guò)平均值的10％。
